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immuquest IQ479說明書

 更新時間:2019-02-28 點擊量:1935

immuquest IQ479說明書

CD44抗體[156-3C11]

流式細胞儀抗CD44:抗體(156-3C11)(IQ479)系列稀釋:紫色同種型陰性對照,粉紅色1/10稀釋

目錄號:IQ479

£226.00

目標抗原

CD44

 

主要說明

小鼠抗CD44 [156-3C11]

 

目錄編號

IQ479

 

數量

0.1毫升

 

濃度

3.2mg / ml的

 

克隆

156-3C11

 

主辦

老鼠

 

同型

的IgG2a

 

免疫原

刺激人體白細胞

 

特異性

該抗體對CD44H分子的表位3具有特異性

 

物種反應性

人類,狒狒

 

純化

蛋白質A.

 

格式

PBS中純化的抗體+ 0.1%疊氮化na

 

應用

IHC-P,流式細胞

 

稀釋液

抗體稀釋應通過滴定確定,但作為指導,嘗試以1:10進行流式細胞術

 

參考

白細胞分型V,牛津大學出版社(1995)

 

數據庫

Entrez Gene:101008690狒狒

Entrez Gene:960人類

Omim:107269人類

SwissProt:P16070 Human

Unigene:502328人類

 

也稱為

LHR抗體; BA-1抗體; CD44抗體; CD44抗體; CD44抗原抗體; CD44分子(印度血型)抗體; CD44分子抗體; CD44_HUMAN抗體; CDw44抗體;細胞表面糖蛋白CD44抗體;硫酸軟骨素蛋白多糖8抗體;抗體CSPG8抗體; ECMR-III抗體; Epican抗體;細胞外基質受體III抗體; GP90淋巴細胞歸巢/粘附受體抗體; HCELL抗體;造血細胞E-和L-選擇素配體抗體;硫酸乙酰肝素蛋白多糖抗體; Hermes抗原抗體;歸巢功能和印度血型系統;抗體; HSA抗體; HUTCH-I抗體; HUTCH1抗體;透明質酸受體抗體; IN抗體; MC56抗體; MDU2抗體; MDU3抗體; MGC10468抗體; MIC4抗體; MUTCH1抗體; PGP-1抗體; PGP -I抗體; PGP1抗體;吞噬糖蛋白1抗體;吞噬糖蛋白I抗體
 

本產品僅供研究使用。不用于治療或診斷用途。

免疫熒光方案 - 甲醛固定

   1.從Tcunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.在室溫下在軌道振蕩器上將細胞在預熱(37℃)對甲醛中孵育12分鐘。
   4.去除PFA并在室溫下在1x PBS中的0.5%Triton X-100中孵育5分鐘。
   5.準備封閉試劑,這也是抗體稀釋劑。
   6.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘/洗滌。
   7.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   8.準備一抗(50μl/蓋玻片)和濕潤染色室。
   9.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并短暫風干。
  10.在室溫下在黑暗的染色室中與一抗孵育1小時。在此期間準備二抗。
  11.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5個燒杯/ 5個計數)
  12。在室溫下在黑暗的染色室中與第二抗體孵育1小時。
  13.用1x PBS洗滌細胞5次。
  14.登上達皮。

溶液(染色當天新鮮制備)。

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:3.5%對甲醛。

1.75g PFA在20ml d.H2O中加5滴1M NaOH。在50-60℃的熱板上攪拌直至溶解。加入4滴IN HCl并檢查pH指示條。PH值應為7.4。完成體積,d.H20至25ml,加入25ml 2xPBS。在添加到蓋玻片之前檢查pH值。


免疫熒光方案 - 甲醇/丙酮固定

   1.從TCunit收集細胞,并用吸力從培養皿中取出培養基。
   2.用1x PBS洗滌并取出。
   3.用冷甲醇:丙酮1:1在冰上固定細胞10分鐘。
   4.制備阻斷試劑,這也是抗體的稀釋劑。
   5.取出固定劑并在室溫下用1x PBS洗滌細胞3次,在軌道振蕩器上洗滌4分鐘。
   6.在室溫下用1%NCS和1x PBS封閉30分鐘。
   7.準備一抗(50?l /蓋玻片)和濕染色室。
   8.在室溫下用1x PBS洗滌細胞2次并風干約7分鐘。
   9.在室溫下在室溫下與一抗孵育1小時,在染色室中避光。在此期間準備二抗。
  10.用1x PBS洗滌細胞5次(每個燒杯更換5次燒杯/ 5次計數)
  11。在室溫下,在染色室的黑暗中與第二抗體孵育1小時。
  12.用1x PBS洗滌細胞5次。
  13.登上達皮。

溶液(染色當天新鮮制備)

    * 1x磷酸鹽緩沖鹽水。
    *封閉試劑:1x PBS中1%NCS(使用新鮮的10x PBS)。
    *固定液:甲醇:丙酮1:1冰冷。



Western Blotting Protocol

   1.將凝膠轉移到PDVF或硝酸纖維素膜上
   2.將膜置于封閉緩沖液中的塑料托盤中攪拌1小時
   3.在洗滌緩沖液中沖洗
   4.在洗滌緩沖液和一抗中孵育1小時
   5.洗滌6次X用洗滌緩沖液洗滌5分鐘
   6.在洗滌緩沖液和二抗中孵育1小時
   7.用洗滌緩沖液洗滌6X 5分鐘
   8.檢測(例如ECL,Amersham根據制造商的說明)

洗滌緩沖液
PBS + 0.1%Tween 20 

阻斷緩沖液
洗滌緩沖液+ 5%奶粉

所用抗體的濃度取決于每種抗體,抗原的量和所用的檢測方法。通常,稀釋在稀釋的幾百倍稀釋到幾千倍的范圍內,但通常必須憑經驗確定。

 

 

 

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